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曠場實驗方法

【實驗?zāi)康摹?#160;
觀察實驗動物在新異環(huán)境中的自主行為、探究行為與緊張度。
【實驗器材】 
實驗裝置由曠場反應(yīng)箱和數(shù)據(jù)自動采集和處理系統(tǒng)兩部分組成,。大鼠曠場反應(yīng)箱高400mm,底邊長1000mm,內(nèi)壁涂黑,底面平均分為25個4cm×4cm小方格,正上方2 
m處架一數(shù)碼攝像頭,其視野可覆蓋整個曠場內(nèi)部。曠場光照為全人工照明,可人為設(shè)定“白天”和“黑夜”,白天由兩側(cè)墻壁的4只節(jié)能燈發(fā)出約2001ux照度來模擬,夜晚由一側(cè)墻的紅外光源提供照明。實驗人員和計算機等設(shè)備位于另一房間以減小對動物的干擾,實驗室背景噪音控制在65dB以下。
小鼠曠場反應(yīng)箱高25~30cm,底邊長72cm,內(nèi)壁涂黑,底面(軟件)平均分為64個小方格。數(shù)據(jù)自動采集和處理系統(tǒng)同上。 
【實驗原理】 
曠場實驗(open field 
test)又稱敞箱實驗,是評價實驗動物在新異環(huán)境中自主行為、探究行為與緊張度的一種方法。以實驗動物在新奇環(huán)境之中某些行為的發(fā)生頻率和持續(xù)時間等,反應(yīng)實驗動物在陌生環(huán)境中的自主行為與探究行為,以尿便次數(shù)反應(yīng)其緊張度。
【實驗動物】 
大鼠或小鼠。


【實驗方法與步驟】 
實驗在安靜的環(huán)境下進(jìn)行。將動物放入箱內(nèi)底面中心,同時進(jìn)行攝像和計時。觀察一定時間后停止攝像,觀察時間可根據(jù)實驗擬定,一般為3~5 
min。清洗方箱內(nèi)壁及底面,以免上次動物余留的信息(如動物的大、小便、氣味)影響下次測試結(jié)果。更換動物,繼續(xù)實驗。
【觀察指標(biāo)】
根據(jù)計算機軟件設(shè)計不同可觀察的參數(shù)不同,如單位時間內(nèi)動物在中央格停留時間,某一肢體越過的格子數(shù)為水平得分(crossing),后肢站立次數(shù)為垂直得分(rearing),修飾次數(shù),尿便次數(shù);運動速度,運動距離,休息時間,沿邊運動距離,中央運動距離等。
【注意事項】
(1)動物在24 
h內(nèi)有其活動周期,故每次實驗應(yīng)選擇在同一時間段內(nèi)完成。
(2)實驗應(yīng)在隔音,光強度和溫、濕度適宜且保持一致的行為實驗室內(nèi)進(jìn)行。
(3)兩次實驗之間清洗實驗設(shè)備,以免上次動物余留信息影響下次實驗結(jié)果。
【對曠場實驗方法的評價】
曠場實驗是評價實驗動物在新異環(huán)境中自主行為、探究行為與緊張度的一種常用方法。操作簡便,方法可靠。特別是計算機技術(shù)和圖像處理技術(shù)的引入,使動物行為分析的檢測指標(biāo)大為增加,且具有高效、無創(chuàng)、靈敏、客觀等諸多優(yōu)點。

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