PCR凝膠成像實驗時的安全防護
上海領成生物科技有限公司 / 2013-05-30
對于廣大實驗科研工作者來說大家在做PCR凝膠成像實驗時應注意以下幾個問題:
1.EB染料的安全使用
EB(Ethidium bromide):即溴化乙錠是一種高度靈敏的熒光染色劑,廣泛用于觀察瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠中的核酸大分子。 在302nm 紫外光激發下溴化乙錠能夠放射出橙紅色熒光信號,用Polaroid 底片或有CCD 成像頭的凝膠成像處理系統可以捕捉拍攝這種信號。因此EB染料廣泛用于分子生物學實驗。
但目前認為EB染料是一種強誘變劑,具有高致癌性。因此在實驗過程中一定要注意安全。實驗結束后要對EB染料凈化處理,以免危害人身安全及污染環境。對于含有EB染料的溶液可做如下處理:
EB含量超過0.5mg/ml:首先用水將其濃度稀釋至0.5mg/ml以下;然后加入一倍體積的0.5mol/L KMnO4,混勻,再加入等量的25mol/L HCl,混勻,置室溫下數小時;后加入一倍體積的2.5mol/L NaOH,混勻并廢棄。
EB含量小于0.5mg/ml:首先按1mg/ml的量加入活性炭,輕搖混勻后置室溫下1小時;然后用濾紙過濾溶液,并將活性碳與濾紙密封廢棄。
2.對于紫外線的防護
雖然適量紫外線對人體具有一定的保健作用,但對于科學工作者來說往往要接觸大量的紫外輻射,因此正確的防護尤為重要。
過量過強紫外線作用于皮膚時,易引起皮膚出現紅斑,水皰甚至水腫,嚴重的還可引起皮膚癌等。作用于眼睛可引起眼痛,流淚等進而引起各種炎癥反應,嚴重的還可能誘發白內障。過量強紫外線作用于中樞神經系統,可引發頭痛、頭暈、體溫升高等不適癥狀。